1.
試薬の調製法
試薬の溶解、希釈及び混合はディメンション シリーズによって自動的に行われます。
**2.
必要な器具・器材・試料等
・ディスクリート方式臨床化学自動分析装置 ディメンション シリーズ
・HCG標準液(品目コード:RC430)
・ウォッシュバッファー(品目コード:RD701)
・試薬プローブ洗浄液(品目コード:RD702)
・サンプルプローブ洗浄液(品目コード:RD703)
・IMTプローブ洗浄液(品目コード:RD704)
・検体希釈液
その他の必要な器具・器材等についてはディメンション・オペレーターマニュアルを参照ください。
3.
操作方法
(1)
本品をディメンション シリーズの所定位置に装填します。
(2)
患者ID及び検査項目を入力します。検体(血清、血漿及び標準液)を指定された位置に装填し、操作ボタンを押します。下記の手順で自動的に分析が行われます。
(*3)
検体(40μL)及び第二試薬と第五試薬の混合液(40μL)が反応ベッセルに分注混和され、42.0℃**で3.5分間インキュベーションされます。
(4)
インキュベーション後、反応しなかった試薬及び検体が磁性分離と洗浄により除去されます。
(5)
続いて第一試薬(110μL)が反応ベッセルに分注混和され、3.7分間インキュベーションされます。
(6)
インキュベーション後、反応しなかった試薬が磁性分離と洗浄により除去されます(洗浄2回/4.1分間)。
(7)
(6)の反応液(50μL)が反応キュベットに移され、第三試薬と第四試薬の混合液(175μL)及び精製水(165μL)が分注混和され、1.5分間反応が行われます。
(8)
反応液の吸光度が2波長(577及び700nm)でレート測定され、検体中のhCG濃度(mIU/mL)に変換されます。
(9)
測定結果がプリントアウトされます。
**ディメンション EXL LMを使用した場合の反応温度は37℃です。
**4.
較正(キャリブレーション)
一般的な較正手順はディメンション・オペレーターマニュアルに記載されています。
本法の較正を行う場合、以下を考慮の上実施ください。
較正物質 :HCG標準液を使用ください。
較正物質濃度 :0、25、150、500、1000(mIU/mL)
注意)当社標準液を使用の際は、該当製品の添付文書に記載さ
れている数値を使用ください。
測定回数 :レベル1 :3重測定
レベル2,3,4 :2重測定
レベル5 :3重測定
較正頻度 :試薬カートリッジのロット変更時或いは同一ロットにおいても
60日ごとに必ず較正を行ってください。
*較正が必要な場合 :・試薬カートリッジのロットを変更する場合
・点検又は修理後の精度管理の結果により必要と思われる場合
・各施設における精度管理方法に基づき必要とされる場合
・行政により求められた場合
指定係数 :C0:−6900 C1:17500 C2:−0.6
:C3:5000 C4:0.5
5.
精度管理
濃度既知の精度管理物質を少なくとも1日1回、2濃度測定ください。測定結果が許容範囲外の場合は、各施設の手順に従い対処ください。5重測定の再現性の結果が以下のようであれば、何らかの異常の可能性があります。
1.
基準範囲
基準範囲は、ノンパラメトリック法(95パーセンタイル)により算出されました。各施設でディメンション シリーズによる基準範囲を設定ください。
hCG濃度は妊娠第1週目に急速に増加し、およそ2日ごと倍増していきます。hCG濃度が25mIU/mLを超えると、妊娠初期を示しますが、最終月経、骨盤内診察、及び他の臨床検査の日付で臨床的症状を判断ください
5。測定結果が正常値との境界にある場合は48時間後に再度検体採取をしてください
6,7。
hCG濃度は妊娠早期に急速に増加し、10〜12週間で最高値5,000〜200,000mIU/mLまで達し、妊娠第3期までに1,000〜50,000mIU/mLまで減少します
8,9,10,11。hCG濃度の減少もしくは低下は、異常妊娠を示している可能性があるため、さらに追跡検査や臨床評価を行ってください。妊娠期間全体の中、hCG濃度は妊娠期間の違いで変化します。以下の表に示します。
hCG濃度と妊娠期間
11
2.
判定上の注意
*・患者検体はヒト異好性抗体を含んでいる可能性があるので、それとの免疫反応により結果が偽陽性、偽陰性になることがあります。本法は、ヒト異好性抗体の影響を最小限にしています12。しかし、すべての患者検体からこの影響を除去できるわけではありませんので、測定結果が臨床所見や患者の治療歴と矛盾する場合には、注意して診断ください12。
・血栓性疾病や腫瘍血栓とも関連してhCGが上昇することがあります。これらの疾病の可能性は妊娠の診断がなされる前に考慮されなければなりません9,13。この試験は、癌患者治療のモニタリングのマーカーとしては使用できません。
・本法は2ステップEIA法により抱合試薬を添加する前に過剰の粒子を取り除きますので、フック現象の影響を最小限にします14。本法は、1,000,000mIU/mLまでフック現象は見られません。
*3.
測定限界
・結 果 :200,000mIU/mLを超えた場合には、検体を希釈ください。
・希釈方法 :検体希釈液を用いて検体を1:2に希釈します。検体属性入力時に希釈
係数を“2”と入力ください。希釈した検体は、装置により自動的に1:
200に希釈されます。最終的な結果は装置により算出されます。
(例:測定値×2×200=最終結果)
・自動希釈法:自動希釈測定範囲は200,000mIU/mLです。自動希釈検体量は2μL
です。
・結果が1mIU/mL未満の場合、数値ではなく“1mIU/mL未満”と報告されます。
4.
エラーメッセージ
エラーメッセージが表示された場合は、メッセージの内容が解決されるまでプリントアウトされた報告書を破棄しないでください。メッセージの解決方法の詳細はディメンション・オペレーターマニュアルを参照ください。
*1.
Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture; Approved Standard - Fifth Edition. CLSI/NCCLS document H3-A5 [ISBN 1-56238-515-1]. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA 19087-1898 USA, 2003.
*2.
Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Tubes and Additives for Venous Blood Specimen Collection; Approved Standard - Fifth Edition. CLSI/NCCLS document H1-A5 [ISBN 1-56238-519-4]. CLSI/NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA 19087-1898 USA, 2003.
*3.
Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens; Approved Guideline - Third Edition. CLSI/NCCLS document H18-A3 [ISBN 1-56238-555-0]. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA 19087-1898 USA, 2004.
*4.
Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests, 3rd ed. Washington, DC: AACC Press, 2007: p262.
5.
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6.
Lenton EA, Neal LM, Sulaiman R. Plasma concentration of human chorionic gonadotropin from the time implantation until the second weeks of pregnancy. Fertil Steril 1982: 37-773
7.
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8.
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9.
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10.
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11.
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12.
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13.
Braunstein GD, Grodin JM, Vaitukaitis J, Ross GT. Secretory rates of human chorionic gonadotropin by normal trophoblast. Obstet Gynecol 1973; 115:447-450.
14.
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15.
Krieg AF. Pregnancy Tests and Evaluation of Placental Function in: Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 16th edition, Henry, JB (ed), WB Saunders Co., Philadelphia, PA; 1979:680.